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rRNA去除的必要性

更新時間:2025-10-22      點擊次數(shù):319
   一、rRNA去除的必要性
  在RNA測序(RNA-Seq)中,通常需要先去除rRNA。這是因為總RNA中80%以上都是rRNA,而rRNA提供的轉錄本信息非常少,且測序時會產(chǎn)生大量無用的rRNA序列數(shù)據(jù),浪費寶貴的測序資源。因此去除rRNA可以提高測序效率和數(shù)據(jù)質量。
  二、rRNA去除探針的原理
  1、特異性DNA探針雜交與RNase H消化
  - 使用特異性的DNA探針與rRNA雜交,形成DNA-RNA雜交鏈。RNase H能夠特異性地消化DNA-RNA雜交鏈中的RNA單鏈,而未與探針雜交的mRNA、lncRNA等不受影響,從而富集目標RNA。
  2、探針雜交捕獲與磁珠吸附
  - 通過DNA探針或RNA探針雜交捕獲rRNA,然后利用鏈霉親和素磁珠吸附去除rRNA。這種方法稱為Ribo-Zero-seq。

rRNA去除探針

  三、rRNA去除探針的應用

  1、物種特異性
  - rRNA去除探針需要根據(jù)研究物種的rRNA序列設計特異性的雜交探針。
  2、不同RNA類型
  - 除了去除細胞質中的rRNA,一些試劑盒還可以去除線粒體中的rRNA。
  3、樣本類型
  - rRNA去除探針適用于多種樣本類型,包括新鮮樣本、降解樣本、FFPE(甲醛固定石蠟包埋)樣本等。
  四、rRNA去除探針的優(yōu)勢
  1、高效去除
  - rRNA去除探針可以高效去除rRNA,提高目標RNA的富集效率。
  2、特異性高
  - 探針設計具有高度特異性,能夠準確識別并去除rRNA,而不影響其他目標RNA。
  3、適用范圍廣
  - 適用于多種物種和樣本類型,能夠滿足不同研究需求。
  通過使用rRNA去除探針,可以顯著提高RNA測序的效率和數(shù)據(jù)質量,為轉錄組研究提供更準確的信息。
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